В качестве пеногасителя приме-няли лапрол ПД-1. Подпиточную питательную среду подавали s фермента-тор с помощью перистальтических насосов.


Чтобы посмотреть этот PDF файл с форматированием и разметкой, скачайте файл и откройте на своем компьютере.
Ȼиолоɝия Ɍɚɛлицɚ 1 Нɚкоплɟниɟ ɛиомɚɫɫы пɪоɞɭцɟнɬɚ L- ɬɪɜонинɚ ȿ . ɫо li XT 99 ( ɟɞ . ОП ) ɜ зɚɜиɫимоɫɬи оɬ концɟнɬɪɚции ИɊɎ ɜ пиɬɚɬɟльной ɫɪɟɞɟ Нɚимɟноɜɚниɟ иɫɬочникɚ ɪоɫɬоɜыɯ ɮɚкɬоɪоɜ ɋоɞɟɪжɚниɟ иɫɬочникɚ ɪоɫɬо - ɜыɯ ɮɚкɬоɪоɜ ɜ ɫɪɟɞɟ , ɝ / л Мɚкɫимɚльноɟ нɚкоплɟниɟ ɛиомɚɫɫы , ɟɞ . ОП 0,1 0,1 0,3 0,15 0,6 0,22 0 ,9 0 ,15 Кɭкɭɪɭзный экɫɬɪɚкɬ 1,2 - 0,1 0,15 0,3 0,20 0,6 0,23 0 ,9 0 ,25 Ƚиɞɪолизɚɬ « Пɪоɜиɬɚ » 1,2 0,23 0,1 0,15 0,3 0,21 0,6 0,29 0 ,9 0 ,30 Ƚиɞɪолизɚɬ коɪмоɜыɯ ɞɪожжɟй 1,2 0,30 0,1 0,10 0,3 0,17 0,6 0,28 0,9 0,27 Ƚиɞɪолизɚɬ пɚпɪинɚ 1,2 0,20 0,1 0,24 0,3 0,29 0,6 0,28 0 ,9 0 ,30 Ƚиɞɪолизɚɬ пɟкɚɪɫкиɯ ɞɪожжɟй 1,2 0,30 0,1 0,14 0,3 0,23 0,6 0,25 0,9 0,21 L- Изолɟйцин 1,2 - Кɚк ɜиɞно из полɭчɟнныɯ ɞɚнныɯ , пɪи иɫпользоɜɚнии ɜ ɫоɫɬɚɜɟ пиɬɚ - ɬɟльныɯ ɫɪɟɞ люɛоɝо из иɫɫлɟɞɭɟмыɯ иɫɬочникоɜ ɪоɫɬоɜыɯ ɮɚкɬоɪоɜ ɜоз - можно полɭчиɬь ɛиомɚɫɫɭ пɪоɞɭцɟнɬɚ ȿ . ɫо l і нɚ ɭɪоɜнɟ нɟ мɟнɟɟ 0,22 ɟɞ . ОП , ɞля чɟɝо нɟоɛɯоɞимо ɜнɟɫɬи ɜ пиɬɚɬɟльнɭю ɫɪɟɞɭ опɪɟɞɟлɟнноɟ коли - чɟɫɬɜо ɪоɫɬоɜыɯ ɮɚкɬоɪоɜ . ɋоɝлɚɫно ɞɚнным ɬɚɛл . 1, пɪи ɜнɟɫɟнии ɜ пиɬɚ - ɬɟльнɭю ɫɪɟɞɭ около 0,3 мɝ / мл L- изолɟйцинɚ опɬичɟɫкɚя плоɬноɫɬь кɭльɬɭ - ɪɚльной жиɞкоɫɬи ɞоɫɬиɝɚɟɬ 0,23 ɟɞ ., чɬо количɟɫɬɜɟнно ɫоизмɟɪимо ɫ иɫ - пользоɜɚниɟм&#x 000; ɫложныɯ по ɫоɫɬɚɜɭ ɝиɞɪолизɚɬоɜ ɛɟлокɫоɞɟɪжɚщɟɝ&#x 026;耀 ɫыɪья . ȼ ɬɚɛл . 2 пɪиɜɟɞɟн ɚминокиɫлоɬный ɫоɫɬɚɜ ɪоɫɬоɜыɯ ɮɚкɬоɪоɜ , коɬоɪыɟ ɛыли ɜзяɬы ɜ нɚшиɯ иɫɫлɟɞоɜɚнияɯ ɞля полɭчɟния поɫɟɜноɝо мɚɬɟɪиɚлɚ пɪоɞɭцɟнɬɚ ɬɪɟонинɚ ( ɫм . ɬɚɛл . 1). Ɍɚɛлицɚ 2 Ⱥминокиɫлоɬный ɫоɫɬɚɜ иɫɬочникоɜ ɪоɫɬоɜыɯ ɮɚкɬоɪоɜ Ⱥминокиɫлоɬный ɫоɫɬɚɜ иɫɬочникоɜ ɪоɫɬоɜыɯ ɮɚкɬоɪоɜ , ɝ / л Ⱥминокиɫлоɬɚ Ƚиɞɪолизɚɬ « П ɪ оɜиɬɚ » Ƚиɞɪолизɚɬ пɟкɚɪ - ɫкиɯ ɞɪожжɟй Кɭкɭɪɭзноɝо экɫɬɪɚкɬɚ Ƚиɞɪолизɚɬ коɪмо - ɜы ɯ ɞɪ ожжɟй Ƚиɞɪолизɚɬ пɚпɪинɚ Ala 3,44 1,56 8,47 2,38 1,80 Val 2,93 1,67 4,86 3,05 1,74 Gl y 3,71 1,28 4,78 2,16 1,59 He 2.6 1,69 3,05 2,34 1,78 Leu 4,90 2,22 8,35 2,49 2,92 Pro 3,72 1,17 9,09 2,56 1,75 Th r 2,65 1,17 4,21 2,25 1,12 H-Se r 3,71 0,92 10,84 3,27 1,67 0,89 0,53 2,05 0,61 0,23 Phe 2,71 1,51 3,06 1,95 1,75 Asp 5,6 3,57 7,46 4,93 4,52 Glu 10,2 5,36 16,17 8,46 6,13 Orn 0,31 - - - - Lys 3,15 3,23 1,86 3,53 3,21 63 ȼɟɫɬник ȻȽɍ . ɋɟɪ . 2. 2007. № 1 __________________________________________________ Нɚ оɫноɜɚнии ɞɚнныɯ ɬɚɛл . 1 можно пɪɟɞположиɬь , чɬо пɪи нɚкоплɟнии ɛиомɚɫɫы пɪоɞɭцɟнɬɚ E. ɫо l і опɪɟɞɟляющɟɟ знɚчɟниɟ имɟɟɬ концɟнɬɪɚция ɜ пиɬɚɬɟльной ɫɪɟɞɟ L- изолɟйцинɚ . Оɞнɚко , кɚк ɜиɞно из ɬɚɛл . 1, 2, ɞля нɚ - коплɟния ɬоɝо жɟ количɟɫɬɜɚ ɛиомɚɫɫы пɪоɞɭцɟнɬɚ L- ɬɪɟонинɚ ɜ пиɬɚɬɟль - нɭю ɫɪɟɞɭ нɟоɛɯоɞимо ɜноɫиɬь ɜ чɟɬыɪɟ ɪɚзɚ ɛольшɟ кɭкɭɪɭзноɝо экɫɬɪɚкɬɚ , чɟм , нɚпɪимɟɪ , ɝиɞɪолизɚɬɚ пɟкɚɪɫкиɯ ɞɪожжɟй . ȼмɟɫɬɟ ɫ ɬɟм ɫоɞɟɪжɚниɟ изолɟйцинɚ ɜ кɭкɭɪɭзном экɫɬɪɚкɬɟ пɪɚкɬичɟɫки ɜ ɞɜɚ ɪɚзɚ ɜышɟ по ɫɪɚɜнɟнию ɫ ɝиɞɪолизɚɬом пɟкɚɪɫкиɯ ɞɪожжɟй ( ɫм . ɬɚɛл . 2). Экɫпɟɪимɟн - ɬɚльныɟ ɞɚнныɟ ( ɫм . ɬɚɛл . 1 и 2) ɫɜиɞɟɬɟльɫɬɜɭюɬ о ɬом , чɬо изолɟйцин окɚзыɜɚɟɬ ɫɬимɭлиɪɭющɟɟ ɞɟйɫɬɜиɟ нɚ ɪоɫɬ ɛиомɚɫɫы пɪоɞɭцɟнɬɚ L- ɬɪɟо - нинɚ , оɞнɚко ɬолько ɜ ɬом ɫлɭчɚɟ , коɝɞɚ ɞɚннɚя ɚминокиɫлоɬɚ яɜляɟɬɫя ɟɞинɫɬɜɟнным ИɊɎ ɜ поɫɟɜной ɫɪɟɞɟ . ȿɫли жɟ изолɟйцин ɜɯоɞиɬ ɜ ɫоɫɬɚɜ иɫɬочникɚ ɪоɫɬоɜыɯ ɮɚкɬоɪоɜ , ɬо линɟйной зɚɜиɫимоɫɬи мɟжɞɭ нɚкоплɟни - ɟм ɛиомɚɫɫы шɬɚммом - пɪоɞɭцɟнɬом и концɟнɬɪɚциɟй изолɟйцинɚ нɟ нɚ - ɛлюɞɚɟɬɫя . Пɪоɜɟɞɟнный нɚми ɚнɚлиз ɚминокиɫлоɬноɝо ɫоɫɬɚɜɚ кɭльɬɭɪɚльн 6;耀й жиɞ - коɫɬи , полɭчɟнной ɜ пɪоцɟɫɫɟ ɜыɪɚщиɜɚния поɫɟɜноɝо мɚɬɟɪиɚлɚ , покɚзɚл , чɬо пɪи нɚкоплɟнии ɛиомɚɫɫы пɪоɞɭцɟнɬɚ пɪоиɫɯоɞиɬ ɭɬилизɚция пɪɚкɬи - чɟɫки ɜɫɟɯ ɚминокиɫлоɬ , ɜɯоɞящиɯ ɜ ɫоɫɬɚɜ пиɬɚɬɟльныɯ ɫɪɟɞ . Ɍɚкжɟ ɭɫɬɚ - ноɜлɟно , чɬо кɭльɬɭɪɚльн 5;ꀀя жиɞкоɫɬь , полɭчɟннɚя поɫлɟ ɜыɪɚщиɜɚния пɪо - ɞɭцɟнɬɚ ɬɪɟонинɚ нɚ пиɬɚɬɟльныɯ ɫɪɟɞɚɯ ɫ опɪɟɞɟлɟнными ɪоɫɬоɜыми ɮɚкɬоɪɚми , имɟɟɬ поɜышɟнноɟ ɫоɞɟɪжɚниɟ ɚɫпɚɪɚɝиноɜой киɫлоɬы и ɝомо - ɫɟɪинɚ ( ɬɚɛл . 3). Ɍɚɛлицɚ 3 Ⱥминокиɫлоɬны 6;  ɫоɫɬɚɜ кɭльɬɭɪɚльной жиɞкоɫɬи , полɭчɟнно&#x 026;  ɜ пɪоцɟɫɫɟ ɜыɪɚщиɜɚния поɫɟɜноɝо мɚɬɟɪиɚлɚ пɪоɞɭцɟнɬɚ ɬɪɟонинɚ Ⱥминокиɫлоɬный ɫоɫɬɚɜ кɭльɬɭɪɚльн&#x 026;耦  жиɞкоɫɬи , ɝ / л Ⱥминокиɫлоɬɚ Ƚиɞɪолизɚɬ « Пɪоɜиɬɚ » Ƚиɞɪолизɚɬ пɟкɚɪ - ɫки ɯ ɞ ɪ ожжɟй Кɭкɭɪɭзны 6;  экɫɬɪɚкɬ Ƚиɞɪолизɚɬ коɪмо - ɜыɯ ɞɪожжɟй Ƚиɞɪолизɚɬ пɚпɪинɚ Ala 0,26 0,49 0,91 0,23 0,40 Val 0,11 0,06 0,27 0,17 0,27 Gl y 1,05 0,95 1,94 0,14 0,56 lie 0,23 0,14 0,28 0,2 0,34 Leu 0,19 0,2 0,64 0,37 0,58 Pro 0,53 0,61 0,60 0,24 0,31 Th r 0,71 0,12 0,28 0,30 0,12 H-Se r 0,25 1,43 0,85 0,91 0,84 0,02 0,12 0,19 0,02 0,03 Phe 0,15 0,17 0,25 0,35 0,42 As p 0,14 4,43 0,25 0,78 0,67 Glu 0,57 0,06 0,98 0,11 0,10 Orn 0,12 - - - - Lys 0,01 0,35 0,09 0,23 0,07 Ⱥнɚлиз ɞɚнныɯ лиɬɟɪɚɬɭɪы покɚзыɜɚɟɬ , чɬо ɭкɚзɚнныɟ ɚминокиɫлоɬы ɭчɚɫɬɜɭюɬ ɜ пɪоцɟɫɫɟ ɛиоɫинɬɟзɚ ɬɪɟонинɚ ɜ микɪоɛной клɟɬкɟ [8], коɬоɪый пɪоɬɟкɚɟɬ ɜ нɟɫколько эɬɚпоɜ ( ɪиɫ . 1). ȼ ɞɚльнɟйшиɯ иɫɫлɟɞоɜɚнияɯ поɫɟɜной мɚɬɟɪиɚл пɪоɞɭцɟнɬɚ ȿ . ɫо l і , по - лɭчɟнный нɚ пиɬɚɬɟльныɯ ɫɪɟɞɚɯ , ɫоɞɟɪжɚщиɯ иɫɫлɟɞɭɟмыɟ иɫɬочники ɪоɫɬоɜыɯ ɮɚкɬоɪоɜ , иɫпыɬыɜɚли ɜ пɪоцɟɫɫɟ ɛиоɫинɬɟзɚ L- ɬɪɟонинɚ 8 лɚɛо - ɪɚɬоɪном ɮɟɪмɟнɬɟɪɟ . ȼ кɚчɟɫɬɜɟ пɪимɟɪɚ нɚ ɪиɫ . 2 пɪɟɞɫɬɚɜлɟнɚ ɞинɚ - микɚ нɚкоплɟния ɬɪɟонинɚ и ɭɬилизɚция ɋɚɯɚɪоɜ ( Ɋȼ ) шɬɚммом - пɪоɞɭ - цɟнɬом ȿ . ɫо l і ɏɌ -99 пɪи зɚɫɟɜɟ пиɬɚɬɟльной ɫɪɟɞы поɫɟɜным мɚɬɟɪиɚлом , полɭчɟнным ɫ иɫпользоɜɚниɟм ɞɜɭɯ ɪɚзличныɯ иɫɬочникоɜ ɪоɫɬоɜыɯ ɮɚк - ɬоɪоɜ : ɝиɞɪолизɚɬɚ пɚпɪинɚ и ɝиɞɪолизɚɬɚ пɟкɚɪɫкиɯ ɞɪожжɟй . Опɬичɟɫкɚя плоɬноɫɬь поɫɟɜноɝо мɚɬɟɪиɚлɚ ɫоɫɬɚɜлялɚ 0,23-0,25 ɟɞ . ОП . Очɟɜиɞно , чɬо кɚчɟɫɬɜо поɫɟɜноɝо мɚɬɟɪиɚлɚ имɟɟɬ ɜɚжноɟ знɚчɟниɟ ɜ пɪоцɟɫɫɟ ɛиоɫинɬɟзɚ L- ɬɪɟонинɚ . Ⱥнɚлиз полɭчɟнныɯ ɞɚнныɯ ( ɫм . ɪиɫ . 2) 64 Ȼиолоɝия ɫɜиɞɟɬɟльɫɬɜɭɟɬ оɛ опɪɟɞɟляющɟй ɪоли ɚɫпɚɪɚɝиноɜои киɫлоɬы и ɝомоɫɟ - ɪинɚ ɜ пɪоцɟɫɫɟ ɛиоɫинɬɟзɚ L- ɬɪɟонинɚ . Ɍɚк , пɪи иɫпользоɜɚнии ɜ пɪоцɟɫɫɟ ɛиоɫинɬɟзɚ поɫɟɜноɝо мɚɬɟɪиɚлɚ , ɫоɞɟɪжɚщɟɝо ɝиɞɪолизɚɬ пɟкɚɪɫкиɯ ɞɪожжɟй , мɚкɫимɚльный ɭɪоɜɟнь нɚкоплɟния цɟлɟɜой ɚминокиɫлоɬы (1) ɫо - ɫɬɚɜил поɪяɞкɚ 53-55 ɝ / л зɚ 30-32 ч ɮɟɪмɟнɬɚции . Кɚк ɜиɞно из ɞɚнныɯ ɬɚɛл . 3, поɫɟɜнɚя ɫɪɟɞɚ ɜ ɞɚнном экɫпɟɪимɟнɬɟ ɫоɞɟɪжɚлɚ ɜ ɫɜоɟм ɫоɫɬɚɜɟ ɚɫпɚɪɚɝиноɜɭю киɫлоɬɭ и ɝомоɫɟɪин - ɚминокиɫлоɬы , пɪɟɞшɟɫɬɜɭющиɟ ɛиоɫинɬɟзɭ L- ɬɪɟонинɚ . Пɪи зɚɫɟɜɟ ɮɟɪмɟнɬɚционной пиɬɚɬɟльной ɫɪɟɞы поɫɟɜным мɚɬɟɪиɚлом , ɜыɪɚщɟнным ɫ иɫпользоɜɚн 6;‥怀 ɝиɞɪолизɚɬɚ лɚпɪи - нɚ , коɬоɪый нɟ ɫɬимɭлиɪɭɟɬ оɛɪɚзоɜɚниɟ ɚɫпɚɪɚɝиноɜои киɫлоɬы и ɝомоɫɟ - ɪинɚ ( ɫм . ɬɚɛл . 3). пɪоɞɭкɬиɜноɫɬь пɪоцɟɫɫɚ ɛиоɫинɬɟзɚ ɬɪɟонинɚ ɫнижɚɟɬɫя пɪɚкɬичɟɫки ɜ 1,7 ɪɚзɚ (2). Ⱦинɚмикɚ ɭɬилизɚции иɫɬочникоɜ ɭɝлɟɪоɞноɝо 65 ��&#x /Ty;&#xpe /;&#xPara;&#x /Na;&#xme /;&#xPara;� 00;&#x /Ty;&#xpe /;&#xPara;&#x /Na;&#xme /;&#xPara;� 00;ȼɟɫɬник ȻȽɍ . ɋɟɪ . 2. 2007. № 1 __________________________________________________ пиɬɚния (3, 4) ɬɚкжɟ покɚзɚлɚ , чɬо пɪи иɫпользоɜɚнии ɜ пɪо - цɟɫɫɟ ɛиоɫинɬɟзɚ L- ɬɪɟонинɚ поɫɟɜноɝо мɚɬɟɪиɚлɚ нɟоɛɯо - ɞимоɝо кɚчɟɫɬɜɚ ɫɭщɟɫɬɜɭɟɬ ɜозможноɫɬь ɭɜɟличиɬь ɜыɯоɞ ɬɪɟонинɚ ɫ ɟɞиницы зɚɬɪɚ - чɟнноɝо ɫыɪья и ɫнизиɬь ɫɟɛɟ - ɫɬоимоɫɬь ɟɝо пɪоизɜоɞɫɬɜɚ . Полɭчɟнныɟ ɪɟзɭльɬɚɬы ɫɜиɞɟɬɟльɫɬɜɭюɬ о ɬом , чɬо нɚиɛольшɭю ɚкɬиɜноɫɬь шɬɚмм - пɪоɞɭцɟнɬ E ɫо li пɪояɜляɟɬ пɪи иɫпользоɜɚнии поɫɟɜноɝо мɚ - ɬɟɪиɚлɚ , ɫоɞɟɪжɚщɟɝо ɜ ɫɜоɟм ɫоɫɬɚɜɟ ɚɫпɚɪɚɝи 6;瀀оɜɭю киɫло ɬɭ и ɝомоɫɟɪин - ɚминокиɫлоɬы , пɪɟɞшɟɫɬɜɭющиɟ оɛɪɚзо ɜɚнию ɬɪɟонинɚ . ɍɫɬɚноɜлɟнɚ ɬɚкжɟ ɫɬимɭлиɪɭющɚя ɪоль изолɟйцинɚ пɪи ɜыɪɚщиɜɚнии ɛиомɚɫɫы пɪоɞɭцɟнɬɚ . Оɫоɛɟнно чɟɬко ɪоль изолɟйцинɚ пɪояɜляɟɬɫя , коɝɞɚ эɬɚ ɚминокиɫлоɬɚ ɜыɫɬɭпɚɟɬ ɟɞинɫɬɜɟнным иɫɬочником ɪоɫɬоɜоɝо ɮɚкɬоɪɚ ɜ пиɬɚɬɟльныɯ ɫɪɟɞɚɯ . 1. Пɚɬоɜ ȼ . К ., Люɛинɚ Ⱥ . Ю . Полɭчɟниɟ ɚминокиɫлоɬ и иɯ ɪоль ɜ пɪоɛлɟмɟ пиɬɚния . М ., 1979. ɋ . 58. 2 Ноɪмиɪоɜɚниɟ коɪмлɟния ɫɟльɫкоɯозяйɫɬ&#x 025;쀥瀀ной пɬицы по ɞоɫɬɭпным ɚминокиɫлоɬɚм . ɋɟɪɝиɟɜ Поɫɚɞ , 2000. ɋ . 22. З . Ƚɪиɝоɪьɟɜ Ю . Ƚ . // ȼопɪоɫылиɬɚния 19S2. № 5. ɋ .23. 4. Якɭɛɟ ɏ .- Ⱦ ., ȿшкɚйɬ X. Ⱥминокиɫлоɬы , пɟпɬиɞы , ɛɟлчи . М ., 1985. 5. Debabov V.G. Overproduction of microbial products. London, 1982. 6. Ȼоɫɟнко A.M., Якимоɜич H.H., Шиляоɜɚ Ⱥ . П ., Якимоɜич И . ȼ . // Ɍɟз . ɞокл . ɜɫɟɫоюз . ɫимпоз . « Ȼиоконɜɟɪ&#x 026;뀀ия ɪɚɫɬиɬɟльноɝо ɫыɪья ». Ɋиɝɚ . 1982. Ɍ . 1 ɋ . 40. 7. Yukawa H., Terasawa М . // ɋ h ɟ m. ȿɫо n. Review. 1981. Vol. 13. № 9. P. 16. 8. Eggeling I., Prefferle W., Sahm A. Basic biotechnology. Cambridge, 2002. P. 294. Поɫɬɭпилɚ ɚ ɪɟɞɚкцию 27.06 06 Николɚй Николɚɟɜич Якимоɜич - ɫɬɚɪший нɚɭчный ɫоɬɪɭɞник , кɚнɞиɞɚɬ ɬɟɯничɟɫкиɯ нɚɭк . Ⱥлɟкɫɚнɞɪ Ⱥлɟкɫɚнɞɪоɜич Ȼильɞюкɟɜи&#x 027;က - млɚɞший нɚɭчный ɫоɬɪɭɞник . Иɪинɚ ȼɚɫипьɟɜнɚ Якимоɜич - нɚɭчный ɫоɬɪɭɞник . 66 ȼɟɫɬник ȻȽɍ . ɋɟɪ . 2. 2007. № 1 __________________________________________________ ɫɬи L- ɬɪɟонинɚ (5]. ɋɪɟɞи компонɟнɬоɜ пиɬɚɬɟльныɯ ɫɪɟɞ оɫоɛоɟ знɚчɟниɟ имɟюɬ ɪоɫɬоɜыɟ ɮɚкɬоɪы - ɜɟщɟɫɬɜɚ , опɪɟɞɟляющиɟ ɫкоɪоɫɬь ɪоɫɬɚ пɪо - ɞɭцɟнɬɚ , мɚкɫимɚльный ɭɪоɜɟнь нɚкоплɟния ɛиомɚɫɫы и цɟлɟɜой ɚмино - киɫлоɬы . Цɟль нɚɫɬоящɟй ɪɚɛоɬы - изɭчɟниɟ ɜлияния пɪиɪоɞы и концɟнɬɪɚции ɪɚзличныɯ иɫɬочникоɜ ɪоɫɬоɜыɯ ɮɚкɬоɪоɜ ( ИɊɎ ) нɚ ɜыɪɚщиɜɚни&#x 025; ɛиомɚɫɫы и ɛиоɫинɬɟз ɬɪɟонинɚ ɝɟнноинжɟнɟɪны&#x 026;怀 пɪоɞɭцɟнɬом Escherichia coli ɏɌ -99. Мɚɬɟɪиɚл и мɟɬоɞикɚ ȼ кɚчɟɫɬɜɟ пɪоɞɭцɟнɬɚ L- ɬɪɟонинɚ иɫпользоɜɚли ɝɟнноинжɟнɟɪный шɬɚмм Escherichia coli, ɫоɞɟɪжɚщий мноɝокопийнɭю плɚзмиɞɭ pYN 7 ( молɟ - кɭляɪнɚя мɚɫɫɚ 5,8 МȾɚ ), коɬоɪɚя оɛɟɫпɟчиɜɚɟɬ ɭɫɬойчиɜоɫɬь к пɟнициллинɭ и нɟɫɟɬ ɝɟны ɬɪɟониноɜоɝо опɟɪонɚ . Кɭльɬɭɪɭ ɜыɪɚщиɜɚли ɜ ɬɟчɟниɟ 18-22 ч пɪи ɬɟмпɟɪɚɬɭɪɟ 37±0,5 º ɋ ɜ пɪоɛиɪкɚɯ нɚ ɫкошɟнном мяɫопɟпɬонном ɚɝɚɪɟ ɫ ɞоɛɚɜлɟниɟм 2 % ɫɚɯɚ - ɪозы и 100 мкɝ / мл пɟнициллинɚ . ɋмыɜ кɭльɬɭɪы ɫ коɫякоɜ оɫɭщɟɫɬɜляли ɮизиолоɝичɟɫким ɪɚɫɬɜоɪом . Полɭчɟннɭю ɫɭɫпɟнзию иɫпользоɜɚли пɪи зɚ - ɫɟɜɟ пиɬɚɬɟльныɯ ɫɪɟɞ , пɪɟɞнɚзнɚчɟнныɯ ɞля полɭчɟния поɫɟɜноɝо мɚɬɟ - ɪиɚлɚ ɜ кɚчɚлочныɯ колɛɚɯ . ȼыɪɚщиɜɚниɟ поɫɟɜноɝо мɚɬɟɪиɚлɚ пɪоɜоɞили 8 кɚчɚлочныɯ колɛɚɯ ɜмɟɫɬимоɫɬью 750 ɫм 3 , ɫоɞɟɪжɚщиɯ по 50 ɫм 3 пиɬɚɬɟльной ɫɪɟɞы . Колɛы ɭɫɬɚнɚɜлиɜɚли нɚ ɬɟɪмоɫɬɚɬиɪɭɟмɭю (37±1 º ɋ ) лɚɛоɪɚɬоɪнɭю кɚчɚлкɭ ɫ чɚɫɬоɬой ɜɪɚщɟния 240 оɛ / мин . Ȼиоɫинɬɟз L- ɬɪɟонинɚ оɫɭщɟɫɬɜляли нɚ лɚɛоɪɚɬоɪной ɮɟɪмɟнɬɚционной ɭɫɬɚноɜкɟ ɜ ɮɟɪмɟнɬɚɬоɪɟ ɜмɟɫɬимоɫɬью 7,0 ɞм 3 , оɛɟɫпɟчɟнном ɫиɫɬɟмɚми ɬɟɪмо - и ɪН - ɫɬɚɬиɪоɜɚния , ɞɚɬчиком измɟɪɟния ɫоɞɟɪжɚния ɪɚɫɬɜоɪɟнноɝо киɫлоɪоɞɚ ɜозɞɭɯɚ , поɞɚɜɚɟмоɝо ɞля ɚэɪɚции ɮɟɪмɟнɬɚционной ɫɪɟɞы , ɞɚɬчиком измɟɪɟния оɛоɪоɬоɜ мɟшɚлки , ɚ ɬɚкжɟ ɫооɬɜɟɬɫɬɜɭющими ɪɟɝиɫɬɪиɪɭющими пɪиɛоɪɚми . Поɫɟɜной мɚɬɟɪиɚл ɜноɫили ɜ ɮɟɪмɟнɬɚɬоɪ ɜ количɟɫɬɜɟ 10 % оɬ нɚ - чɚльноɝо количɟɫɬɜɚ пиɬɚɬɟльной ɫɪɟɞы . ȼ кɚчɟɫɬɜɟ пɟноɝɚɫиɬɟля пɪимɟ - няли лɚпɪол ПȾ -1. Поɞпиɬочнɭю пиɬɚɬɟльнɭю ɫɪɟɞɭ поɞɚɜɚли s ɮɟɪмɟнɬɚ - ɬоɪ ɫ помощью пɟɪиɫɬɚльɬичɟɫкиɯ нɚɫоɫоɜ . Ⱦля изɭчɟния ɞинɚмики ɪоɫɬɚ кɭльɬɭɪы пɪи полɭчɟнии поɫɟɜноɝо мɚɬɟ - ɪиɚлɚ и ɛиоɫинɬɟзɟ L- ɬɪɟонинɚ из кɚчɚлочныɯ колɛ и ɮɟɪмɟнɬɚɬоɪɚ оɬɛи - ɪɚли ɫɬɟɪильныɟ пɪоɛы . Концɟнɬɪɚцию ɛиомɚɫɫы пɪоɞɭцɟнɬɚ ɜ оɬоɛɪɚнныɯ пɪоɛɚɯ опɪɟɞɟляли кɚк ɜɟличинɭ опɬичɟɫкой плоɬноɫɬи ( ОП ) кɭльɬɭɪɚльной жиɞкоɫɬи , ɪɚзɛɚɜлɟнной ɜ 100 ɪɚз . Измɟɪɟния пɪоɜоɞили нɚ ɮоɬоэлɟкɬɪо - колоɪимɟɬɪɟ ɍɏЛ -4.2 пɪи ɞлинɟ ɜолны 440 нм ɫ иɫпользоɜɚниɟм кюɜɟɬы ɬолщиной 0.5 ɫм . Концɟнɬɪɚцию ɬɪɟонинɚ ɜ кɭльɬɭɪɚльной жиɞкоɫɬи ɭɫɬɚнɚɜлиɜɚли мɟɬоɞом ɬонкоɫлойной ɯɪомɚɬоɝɪɚɮии ɜ ɫиɫɬɟмɟ ɪɚɫɬɜоɪиɬɟлɟй ɚцɟɬон – изо - пɪопɚнол - ɚммиɚк . Количɟɫɬɜɟнноɟ опɪɟɞɟлɟниɟ ɫпɟкɬɪɚ ɚминокиɫлоɬ ɜ ɪоɫɬоɜыɯ ɮɚкɬоɪɚɯ и ɜ кɭльɬɭɪɚльной жиɞкоɫɬи пɪоɜоɞили мɟɬоɞом ɝɚзо - жиɞкоɫɬной ɯɪомɚɬоɝɪɚɮии [6]. ɋоɞɟɪжɚниɟ ɫɚɯɚɪɚ нɚɯоɞили по Ȼɟɪɬɪɚнɭ ɜ моɞиɮикɚции Шоɪля [7]. ȼ кɚчɟɫɬɜɟ иɫɬочникоɜ ɪоɫɬоɜыɯ ɮɚкɬоɪоɜ ɜ ɫоɫɬɚɜɟ пиɬɚɬɟльныɯ ɫɪɟɞ иɫпользоɜɚли кɭкɭɪɭзный экɫɬɪɚкɬ , L- изолɟйцин , киɫлоɬныɟ ɝиɞɪолизɚɬы пɚпɪинɚ , ɯлɟɛопɟкɚɪныɯ ɞɪожжɟй , коɪмоɜыɯ ɞɪожжɟй ( нɚ ɝиɞɪолизɚɬɚɯ ɞɪɟɜɟɫины ) и киɫлоɬный ɝиɞɪолизɚɬ « Пɪоɜиɬ ». Иɫɬочником ɭɝлɟɪоɞноɝо пиɬɚния яɜлялɫя ɫɚɯɚɪ - пɟɫок . Концɟнɬɪɚции компонɟнɬоɜ пиɬɚɬɟльныɯ ɫɪɟɞ ɜɚɪьиɪоɜɚли ɜ зɚɜиɫимоɫɬи оɬ зɚɞɚч экɫпɟɪимɟнɬɚ . Ɋɟзɭльɬɚɬы и иɯ оɛɫɭжɞɟниɟ ȼ ɬɚɛл . 1 пɪɟɞɫɬɚɜлɟны ɭɫɪɟɞнɟнныɟ по ɬɪɟм поɜɬоɪным экɫпɟɪимɟнɬɚм ɞɚнныɟ по ɜыɪɚщиɜɚнию поɫɟɜноɝо мɚɬɟɪиɚлɚ плɚзмиɞноɝо пɪоɞɭцɟнɬɚ ȿ . coli ɏɌ -99 пɪи иɫпользоɜɚнии ɜ ɫоɫɬɚɜɟ пиɬɚɬɟльныɯ ɫɪɟɞ ɪɚзличныɯ иɫ - ɬочникоɜ ɪоɫɬоɜыɯ ɮɚкɬоɪоɜ . 62 Ȼиолоɝия ɍȾК 577.150.6:575.24 Н . Н . ЯКИМОȼИЧ , Ⱥ . Ⱥ . ȻИЛЬȾЮКȿȼИЧ , И . ȼ . ЯКИМОȼИЧ ȼЛИЯНИȿ ИɋɌОЧНИКОȼ ɊОɋɌОȼЫɏ ɎȺКɌОɊОȼ НȺ ɊОɋɌ ȻИОМȺɋɋЫ И ȻИОɋИНɌȿЗ ɌɊȿОНИНȺ ȽȿННОИНЖȿНȿɊНЫМ ШɌȺММОМ ESCHERICHIA COLI ɏɌ -99* The influence of nature and concentration of various growth factors on a btomass gain and bio- synthesis of L-threonine by producer strain Escherichia coli XT-99 is investigated. ȼ ɪяɞɟ ɫɬɪɚн ȼоɫɬочной и Зɚпɚɞной ȿɜɪопы . Лɚɬинɫкой Ⱥмɟɪики и ɞɪɭ - ɝиɯ ɪɟɝионɚɯ ɬɪɟонин яɜляɟɬɫя пɟɪɜой лимиɬиɪɭющɟй ɚминокиɫлоɬ 6;耦  ɜ пи - щɟ чɟлоɜɟкɚ [1]. Мноɝочиɫлɟнныɟ иɫɫлɟɞоɜɚния покɚзɚли эɮɮɟкɬиɜноɫɬь ɞоɛɚɜлɟния ɬɪɟонинɚ ɜ ɪɚционы ɫɟльɫкоɯозя 6; ɫɬɜɟнныɯ жиɜоɬныɯ и ɞомɚшнɟй пɬицы [2, 3]. ȼ мɟɞицинɟ ɬɪɟонин нɚɯоɞиɬ пɪимɟнɟниɟ ɜ ɫложной ɫмɟɫи ɚминокиɫлоɬ ɞля пɚɪɟнɬɟɪɚльноɝо пиɬɚния [4]. ȼыɫокоэɮɮɟк 6;쀦‥쀦瀀ым ɬɟɯнолоɝичɟɫким пɪоцɟɫɫом пɪоизɜоɞɫɬɜɚ ɬɪɟони - нɚ яɜляɟɬɫя микɪоɛиолоɝичɟɫкий ɫинɬɟз ɫ поɫлɟɞɭющɟй очиɫɬкой оɬ ɜыɫо - комолɟкɭляɪныɯ ɫоɟɞинɟний и ɜыɞɟлɟниɟм ɚминокиɫлоɬы из кɭльɬɭɪзль - ной жиɞкоɫɬи . Ȼиоɫинɬɟз ɬɪɟонинɚ пɪоɜоɞяɬ нɚ жиɞкиɯ пиɬɚɬɟльныɯ ɫɪɟɞɚɯ , ɫоɞɟɪжɚщиɯ иɫɬочники ɭɝлɟɪоɞноɝо , ɚзоɬноɝо пиɬɚния , мɚкɪо - и микɪоэлɟ - мɟнɬы . ȼ кɚчɟɫɬɜɟ пɪоɞɭцɟнɬоɜ иɫпользɭюɬɫя ɜыɫокопɪоɞɭкɬиɜн 7;倥 ɛɚкɬɟ - ɪиɚльныɟ шɬɚммы , полɭчɟнныɟ ɝɟнноинжɟнɟɪным и мɟɬоɞɚми . Ⱥнɚлиз ɞɚнныɯ лиɬɟɪɚɬɭɪы , ɚ ɬɚкжɟ ɪɟзɭльɬɚɬы ɫоɛɫɬɜɟнныɯ иɫɫлɟɞо - ɜɚний ɫɜиɞɟɬɟльɫɬɜɭюɬ о ɬом , чɬо ɫоɫɬɚɜ пиɬɚɬɟльныɯ ɫɪɟɞ иɝɪɚɟɬ ɜɚжнɭю ɪоль ɜ инɬɟнɫиɮикɚции пɪоцɟɫɫоɜ ɛиоɫинɬɟзɚ ɪяɞɚ ɚминокиɫлоɬ , ɜ чɚɫɬно * Ⱥɜɬоɪы ɫɬɚɬьи - ɫоɬɪɭɞники Инɫɬиɬɭɬɚ ɮиэико - оɪɝɚничɟɫкой ɯимии НȺН Ȼɟлɚɪɭɫи . 61

Приложенные файлы

  • pdf 85822329
    Размер файла: 439 kB Загрузок: 0

Добавить комментарий